落葉性歯髄幹細胞の研究経過

歯の剥離脱落膜歯（SHED）からの樹状幹細胞は、早期異所間葉組織の頭部における神経堤細胞の移動に由来する。 2003年、Miuraらは、7〜8歳の子供の脱落した歯髄における単クローン性、増殖および骨形成能が高く、SHEDと名付けられた単離多能性幹細胞である。 その後、骨形成分化、脂肪生成分化、神経分化および他の多方向分化能を有するSHEDがさらに数多くの研究によって示されている。 （電気歯髄診断器）さらに、落葉状歯髄は、バイオ廃棄物とみなされ、倫理的要求に応じてかなりの量であり、幹細胞の分野では徐々に研究のホットスポットとなっている。 このレビューは、SHEDの基本的な生物学的特性、培養方法および同定方法、多方向の分化能および疾患治療におけるその応用の研究進捗状況を要約する。

第1に、基本的な生物学的特徴を有する脱落型歯髄幹細胞

    今試験幹細胞は、幹細胞の特性は、次の2種類に基づいて、

（1）自己再生能力、特定の機能に分化することができる前駆体を生成するために

（2）能力。より増殖、自己再生、多系列分化を有するSHED、特性の二種類以上を有し、（歯髄幹細胞、DPSC）歯髄幹細胞と比較して、すなわち、SHED、DPSCのテロメラーゼの長さとSHED 2倍であり、その細胞活性が後者よりもはるかに高いことを示している。加えて、いくつかの研究では、培養環境SHEDを変えることによって、示された、増殖の促進に重要な役割を果たしてSHEDに栄養素の不足に、このような低強度レーザー療法（5 J / cm 2）でのように、SHEDの増殖および分化を変化させることができる。投与量によって赤外LEDの光の後、細胞活性および骨形成分化能大幅に増加を当てる;クロルヘキシジンの増殖は、将来の人々が臨床的に使用するのに役立ちます阻害要因SHED、です。研究は、様々な疾患のための条件を提供するために確立された落葉歯髄幹細胞バンクであるテロメラーゼ活性、新鮮な組織SHEDから抽出された複数の等しいに分化する能力の増殖速度、によってSHED低温保存を示します治療は希望をもたらします。

落葉状歯髄幹細胞の培養と同定

環境は幹細胞研究の問題の1つであり、現在、幹細胞を培養するために一般的に使用されている方法は、Miura et al。 実験手順は、脱落した歯を予冷培養培地に入れ、二重リン酸緩衝生理食塩水（PBS）で繰り返し洗浄するために実験室に送ることです。歯冠を分けて、クラウンパルプを取り除きます。 パルプ組織を1mm 3片に切断し、3g / LのタイプIコラゲナーゼおよび4g / Lの中性プロテアーゼで37℃で1時間消化した。単一細胞懸濁液を70μm膜フィルターで濾過し、 α-MEM中で20％ウシ胎仔血清を用いて増殖させ、3日後に培地の半分を交換し、2〜3日ごとに培地を交換し、70〜80％になるとトリプシン 消化後、上清を遠心分離し、ペレットを1：3で継代した。実験では、明らかなコロニー形成および線維芽細胞様SHEDが位相差顕微鏡法によって観察された。（歯科用ルーペ）

奨学生は、幹細胞特異マーカーの表面を用いてそれらを同定することが多い。 STRO-1は、初期マーカーで間葉系幹細胞である、請求、それが識別SHEDに基づいて使用されます。 STRO-1（+）細胞はより原始的な細胞サブセットであることが証明され、血管周囲のパルプに分布する強力な造血支援の動物モデルでのホーミング能力を持っている、最も可能性の高い血管周囲のマイクロSHEDから来ていることを示唆しています環境。さらに、多能性細胞のSTRO-1（+）増殖および分化は、はるかに優れたSTRO-1 - 細胞、したがってさらなる研究および臨床応用マルチセクションの前に選択さSHED細胞STRO-1（+）（）。スプレッドはSHEDときに、第2世代の速度によって14世代は1.4％にSTRO-1（+に）25.4％を発現し、そして細胞多形性を減少させ、線維芽細胞様の形態を呈し、細胞体積の増加、色継代数回、最も未分化の幹細胞の成熟を促したときにあったので、第四世代STRO-1（+）細胞への第二世代のマルチユース、暗く実験[14]。さらに、SHEDはまた、発現される表面特異的分子はCD146、CD90、CD105、CD29、CD73および他の間葉系幹細胞特異的マーカーを含む、システムは、造血起源マークCD45、CD14、CD34分子と内皮細胞表面特異的に発現しません他の間葉起源の幹細胞表面マーカーと非常に類似しているマーカーCD31。また、アルカリホスファターゼ、糖タンパク質、塩基性線維芽細胞成長因子等エンドスタチンのようなマトリックス関連マーカー及び血管形成関連マーカーの発現を、流しました。